신서란(P hormium tenax) 추출물과 분획물에 대한 염증 억제 효과

Abstract

본 연구에서는 신서란 잎의 추출물과 분획물에 대한 항산화, 염증 및 아토피의 개선소재로써 활용 가능성을 확인코자 연구하였다. 항염증 효능을 확인하기 위하여 RAW 264.7 cell에서 신서란 잎 추출물 및 분획물을 활용하여 실험하였다. 아토피 개선 효능을 확인하기 위하여 hIFN-γ로 자극한 HaCaT 세포에서 신서란 잎 추출 물 및 분획물을 활용하여 실험하였다. 우선 신서란을 70% 에탄올에서 추출물을 제 작하였으며, n-hexane, methylene chloride. ethyl acetate, butanol을 이용하여 분획 물을 제작하였다. 70% 에탄올을 이용한 추출물과 분획물의 항산화 활성, 염증 억 제, 아토피 억제를 확인하였다. 그 결과 항산화 효과는 표준물질과 비교하여 그 효 과가 미미하였다. 염증인자 생성 억제 활성은 LPS 무처리군 (0%), LPS 처리군 (100%)과 각 시료를 처리하여 비교분석 하였다. 특히 분획물 중 methylene chloride 분획물과 ethyl acetate 분획물이 LPS로 자극된 RAW 264.7 cell에서 염증성 매개인 자인 prostaglandin E2 (PGE2) 및 nitric oxide (NO)와 pro-inflammatory cytokines (interleukin-6 (IL-6), interleukin-β (IL-β), tumour necrosis factor-α (TNF-α))의 생성을 농도 의존적으로 억제하는 것을 확인하였다. 또한 신서란 추출물 및 분획물 에 의한 NO, PGE₂생성 억제 활성이 iNOS와 COX-2의 발현 억제에 의한 것인지 확인하기 위하여 이들 단백질 수준을 Western blot analysis로 확인한 바 LPS 처리 군에서 iNOS와 COX-2가 발현되었으며, methylene chloride. ethyl acetate 분획물 에서 농도 의존적으로 감소함을 알 수 있었다. 아토피 억제효과를 확인하기 위하여 HaCaT 세포에 interferon γ (INF-γ)로 자극 을 주어 유도되는 chemokines (MDC와 TARC)의 활성억제를 조사하였다. 그 결과 MDC, TARC 생성억제에 methylene chloride, ethyl acetate분획물이 농도 의존적으 로 효과가 있었다. 한바 효능이 있음을 알 수 있었다. 위의 결과들을 통해 신서란 추출물과 분획물은 항산화효과는 미미한 것을 알 수 있으며, 항산화효과는 methylene chloride 분획물에서 농도 의존적으로 억제 효과가 있음을 알 수 있었다. 아토피 억제 효과는 분회물에서 효능이 있음을 알 수 있다. 이 조사 결과를 통하여 신서란을 활용한 기능성 향장소재로의 개발을 위한 기초자 료로서 활용할 수 있을 것이라 사료된다.

This study describes a preliminary evaluation of the anti-oxidative, anti-inflammatory activity, and anti-atopy of P hormium tenax 70% ethanol extract and solvent fractions. In order to effectively screen for a natural preservative agent, we first investigated the anti-oxidant activities such as 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) radical scavenging capacity, superoxide radical scavenging capacity, xanthine oxidase inhibitory activity of their. The antioxidant activities showed in EtOAc and BuOH fraction of P . tenax, compare with ascorbic acid, butylated hydroxy anisole (BHA), trolox, and allopurinol in these assay systems. In addition, we examined the inhibitory effect of P . tenax extract and fractions on pro-inflammatory mediators (Nitric oxide (NO), inducible nitric oxide synthase (iNOS), prostaglandin E2 (PGE2), COX-2) and pro-inflammatory cytokines (tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-6 (IL-6), and interleukin-β (IL-β)) in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells. Finally, we evaluated of their inhibitory effect on the atopic dermatitis-like inflammatory markers (macrophage-derived chemkine (MDC), thymus and activation-regulated chemokine (TARC)) in human keratinocyte HaCaT cells. The CH2Cl2 and EtOAc fractions of P . tenax inhibited the pro-inflammatory factors and atopic dermatitis-like inflammatory markers in a dose dependent manner. These results suggest that P . tenax may have significant effects on oxidative and inflammatory factors and may be provided as a possible anti-oxidant and anti-inflammatory therapeutic plant.