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RAW 264.7 세포에서 제주조릿대(Sasa quelpaertensis Nakai) 잎 추출물의 전염증 매개인자 생성 억제 효과

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Alternative Title
Inhibitory effects of Sasa quelpaertensis Nakai leaf extract on the production of pro-inflammatory mediators in RAW 264.7 cell
Abstract
제주조릿대 (Sasa quelpaertensis Nakai) 는 제주도 한라산 일대에 광범위하게 자생하는 식물이다. Lipopolysaccharide(LPS)로 자극된 RAW 264.7 세포주에서 제주조릿대의 잎의 전염증성 매개인자들에 대한 효과를 조사하여 건강을 위한 천연물질로써의 가능성에 대해 조사하였다. NO는 생명체에서 중요한 생체 매개인자이며, NADPH와 산소를 이용하여 L-arginine으로부터 생성된다. 그러나 과도한 NO 생성물은 세포독성을 나타낸다. 면역학적인 자극을 나타내는 사이토카인 혹은 박테리아는 iNOS을 활성화하고 높은 양의 NO는 NFκB에 의해 생성된다. 제주조릿대 잎 에틸아세테이트 분획물은 NO와 PGE2 그리고 iNOS와 COX-2를 농도 의존적으로 저해하였다. 또한 전염증성 사이토카인인 IL-1β, IL-6 와 TNF-α의 mRNA 수준도 농도 의존적으로 감소시켰다. 그리고 에틸아세테이트 분획물은 ERK1/2 MAP kinase의 인산화와 NFκB 활성화 억제를 하였다. 이러한 결과는 제주조릿대 에틸아세테이트 분획물이 NFκB의 전사활성 억제와 ERK1/2의 인산화를 저해함으로써 전염증성 매개인자들에 대한 억제를 나타내는 것으로 사료된다. 본 연구결과는 제주조릿대 잎 에틸아세테이트 분획물이 항염증제로써의 활용 가능성을 제시하였다.
Sasa quelpaertensis Nakai is a native plant, which is distributed throughout Halla mountain of Jeju Island. In order to evaluate its potentiality as bioresource in human health, I investigated the effect of S. quelpaertensis leaf extract on expression of pro-inflammatory mediators in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW264.7 cells. NO is an important biological mediator in the living organism that is synthesized from L-arginine using NADPH and molecular oxygen. However, the overproduction of NO which is catalyzed by iNOS, a soluble enzyme and active in its dimeric form, is cytotoxic. Immunostimulating cytokines or bacterial pathogens activate iNOS and generate high concentrations of NO through the activation of inducible nuclear factors, including NFκB. Ethylacetate (EtOAc) fraction of the S. quelpaertensis leaf extract inhibited the production of NO, PGE₂, iNOS and COX-2 in a dose-dependent manner. Also, it effectively inhibited mRNAs expression of IL-1β, IL-6 and TNF-α. In addition, EtOAc fraction inhibited the phosphorylation of ERK1/2 MAP kinase and transactivation of nuclear factor-κB (NF-κB). These results indicate that EtOAc fraction suppresses the production of pro-inflammatory mediators via inhibition of NF-κB transactivation and ERK1/2 phosphorylation. Therefore, I suggest that S. quelpaertensis leaf is a promising agent for anti-inflammatory agent and chemopreventive strategies.
Author(s)
황준호
Issued Date
2007
Awarded Date
2007. 2
Type
Dissertation
URI
http://dcoll.jejunu.ac.kr/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000003885
Alternative Author(s)
Hwang, Joon-Ho
Affiliation
제주대학교 대학원
Department
대학원 생명과학과
Advisor
김세재
Table Of Contents
Ⅰ. 서론 = 1
Ⅱ. 재료 및 방법 = 4
1. 시료 채취와 추출 = 4
2. 세포 배양 = 4
3. 세포 독성 측정 = 5
4. NO와 PGE₂ 정량 = 5
5. Immunoblotting = 6
6. RNA 분리 및 RT-PCR = 7
7. Luciferase activity assay = 10
8. iNOS enzyme activity assay = 10
9. 통계학적 분석 = 11
Ⅲ. 결과 = 13
1. 제주조릿대 잎 메탄올 추출물과 그 분획물들의 세포 독성 및 NO 생성 억제 활성 = 13
2. 제주조릿대 잎 에틸아세테이트 분획물의 전염증 매개인자 생성 억제 효과 = 13
1) NO 생성 및 iNOS 유전자 발현에 미치는 영향 = 13
① NO 생성 저해 활성 = 13
② iNOS 단백질 및 mRNA 발현 저해 활성 = 13
2) PGE₂ 생성과 COX-2 유전자 발현 = 20
① PGE₂ 생성 저해 활성 = 20
② COX-2 단백질 발현 저해 활성 = 20
③ COX-2 mRNA 발현 저해 활성 = 20
3) Cytokines mRNAs 발현 억제 활성 = 25
3.NFκB 전사활성화 및 ERK1/2 인산화에 미치는 영향 = 25
1) NFκB 전사활성화 억제 = 25
2) ERK1/2 인산화에 미치는 영향 = 25
Ⅳ. 고찰 = 30
Ⅴ. 인용 문헌 = 34
Ⅵ. 요약 = 42
Degree
Master
Publisher
제주대학교 대학원
Citation
황준호. (2007). RAW 264.7 세포에서 제주조릿대(Sasa quelpaertensis Nakai) 잎 추출물의 전염증 매개인자 생성 억제 효과
Appears in Collections:
General Graduate School > Biology
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