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뽕잎피나무(Tilia taquetii) 잎으로부터 항염 및 주름개선 활성 성분 연구

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Abstract
Phytochemical investigation of the ethanol extract from Tilia taquetii leaves resulted in the isolation of nine constituents; phytol (1), chlorophyll c1 (2), epi-catechin (3), isoquercitrin (4), 3,12,13 - trihydroxyoleanan-28-oic acid (5), oleanolic acid (6), arjunolic acid (7), maslinic acid (8), daucosterol (9). The structures of these compounds were confirmed by comparing their spectroscopic data to those in the literature. As far as we know, all of the compounds except epi-catechin (3) were isolated for the first time from this plant.
In order to study the skin-related properties for the isolated compounds, bioactivity screenings on anti-oxidation, anti-inflammatory activities and anti-elastase activities were conducted.
For the anti-oxidation tests, the compounds 3, 4 and 8 showed strong DPPH radical scavenging activities with SC50 of 5.41, 12.41, 9.75 μg/mL respectively, whose activities were comparable to a positive control vitamin C (SC50 5.71 μg/mL).
On the elastase inhibition studies, the compounds 6 and 8 showed stronger activities with IC50 43.6 μg/mL and 89.5 μg/mL whose activities were comparable to a positive control oleanolic acid (IC50 44.94 μg/mL) and ursolic acid (IC50 32.74 μg/mL).
Effect on human normal fibroblast function, the ethyl acetate fraction and compounds 7, 8 inhibited collagenase (MMP-1) production in a dose-dependent manner by human normal fibroblast cell.
On the screening of anti-inflammatory activities, the compounds 1, 7 and 8 showed the considerable inhibition on the production of nitric oxide for the RAW 264.7 cell without any cytotoxicity. In addition, they reduced LPS-induced secretion of interleukin-6 (IL-6) and interleukin-1β (IL-1β) in RAW 264.7 cell. Also, the ethyl acetate fraction and compound 1, 7 and 8 suppressed the production of NO and IL-6, IL-1β through the decreased expression of iNOS and COX-2, an indication of anti-inflammatory effects.
Based on these results, T. taquetii leaves extract could be potentially applicable as anti-aging and anti-inflammatory agent in cosmeceutical and/or pharmaceutical ingredient.
Author(s)
김수영
Issued Date
2013
Awarded Date
2013. 2
Type
Dissertation
URI
http://dcoll.jejunu.ac.kr/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000006247
Alternative Author(s)
Kim,Su Yeong
Affiliation
제주대학교 대학원
Department
대학원 화학과
Advisor
이남호
Table Of Contents
Ⅰ. 서론 1

Ⅱ. 재료 및 방법 7
1. 시약 및 기기 7
2. 재료 8
3. 추출, 분획 및 분리 9
3-1. 뽕잎피나무 잎의 추출 및 분획 9
3-2. Ethyl acetate fraction의 활성 성분 분리 10
3-2-1. VLC에 의한 분획과정 (제1차) 10
3-2-1-1. VLC를 수행한 분획물에서 화합물 1, 2 분리과정 10
3-2-2. VLC에 의한 분획과정 (제2차) 11
3-2-2-1. VLC를 수행한 분획물에서 화합물 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9
분리과정 11
4. 활성 실험 13
4-1. DPPH radical scavenging activity test 13
4-2. Elastase inhibition activity test 15
4-3. 세포배양 16
4-4. RAW 264.7 cell에서의 nitric oxide (NO) 생성 억제 평가 16
4-5. RAW 264.7 cell에서의 염증성 cytokine TNF-α, IL-6, IL-1β
생성 억제 평가 17
4-6. Immunoblotting 18
4-7. Human normal fibroblasts cell 에서의 MMP-1 저해 활성 실험 19
4-8. 세포독성 평가 실험 20
Ⅲ. 결과 및 고찰 21
1. 화합물의 구조 결정 21
1-1. 화합물 1의 구조 동정 21
1-2. 화합물 2의 구조 동정 24
1-3. 화합물 3, 4의 구조 동정 28
1-4. 화합물 5의 구조 동정 33
1-5. 화합물 6, 7, 8의 구조 동정 40
1-6. 화합물 9의 구조 동정 46
2. DPPH radical scavenging activity 50
2-1. 추출물 및 분획물의 DPPH radical 소거 활성 50
2-2. 분리된 화합물의 DPPH radical 소거 활성 51
3. Elastase inhibition activity 54
3-1. 추출물 및 분획물의 elastase inhibition activity 54
3-2. 분리된 화합물의 elastase inhibition activity 55
4. Human normal fibroblast cell을 이용한 주름개선 실험 결과 57
4-1. 세포 독성 평가 57
4-1-1. 추출물 및 분획물의 세포 독성 평가 57
4-1-2. 분리한 화합물의 세포 독성 평가 58
4-2. Collagenase (MMP-1) 저해활성 결과 61
5. RAW 264.7 cell을 이용한 항염 활성 실험 결과 63
5-1. 추출물 및 분획물의 nitric oxide 생성 억제 및 세포 독성 평가 63
5-2. 화합물 1, 7, 8의 nitric oxide 생성 억제 및 세포 독성 평가 66
5-3. 염증성 cytokine TNF-α, IL-6, IL-1β 생성 억제 평가 69
5-4. COX-2, iNOS의 발현 저해 활성 73
Ⅳ. 요약 및 결론 76

Ⅴ. 참고문헌 78
Degree
Master
Publisher
제주대학교
Citation
김수영. (2013). 뽕잎피나무(Tilia taquetii) 잎으로부터 항염 및 주름개선 활성 성분 연구
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