제주흑우 동결정액 제조에 있어 Ethylene glycol과 항산화제의 조합이 동결 융해 후 정자의 성상에 미치는 영향

Abstract

본 연구에서는 제주흑우의 동결정액 성상을 개선하기 위하여 ethylene glycol과 항산화제로서 taruine, hypotaurine, trehalose의 조합이 동결 융해 후 정자의 운동성, 생존율, 정자막 integrity, 첨체막 integrity 및 정자의 난자 내 침투 능력에 미치는 영향에 대하여 연구하고자 수행하였다. 제주흑우의 동결정액 제조 시 동결보호제로서 5% ethylene glycol을 포함한 희석제를 사용하여 각각 20mM의 taurin, hypotaurin, trehalose를 첨가하여 실험에 공시한 결과 동결 융해한 후 정자의 운동성은 실험군 간의 유의적 차이는 없었다. 정자의 생존성에 있어 taurine, hypotaurine, trehalose의 첨가가 68.10% ± 4.39, 69.20% ± 6.65, 67.95% ± 4.44로서 대조구 63.35% ± 5.58에 비하여 유의적으로 높은 생존성을 나타냈다 (p<0.05). 정자막 integrity에 있어서는 taurine, hypotaurine, trehalose 모두 64.10% ± 5.42, 61.50% ± 3.66, 59.00% ± 3.95로 swelled sperm의 비율이 대조군 53.65% ± 9.72에 비하여 유의적으로 높았다(p<0.05). 정자의 첨체막 양상 변화는 동결 융해 후 taurine과 hypotaurine의 첨가군이 대조군에 비하여 F pattern이 유의적으로 높았으며(p<0.05), taurine과 hypotaurine 첨가군은 대조군에 비해 B pattern이은 유의적으로 낮았다(p<0.05). 특히 AR pattern은 taurine과 hypotaurine의 첨가군이 대조군에 비하여 유의적으로 낮았으며(p<0.05), trehalose 역시 대조군보다 AR pattern 수준이 낮은 비율을 보였으나 유의적 차이는 없었다. 정자의 난자 내 침투능력에 있어 웅성전핵 형성율은 taurine, hypotaurine, trehalose의 첨가 (1.60 ± 0.55, 1.80 ± 0.45, 1.20 ± 0.45)가 대조군 (0.60 ± 0.55) 보다 유의적으로 높게 나타났으며 SFI 점수 역시 taurine, hypotaurine, trehalose의 첨가 (0.70 ± 0.17, 0.80 ± 0.14, 0.58 ± 0.04)가 대조군 (0.40 ± 0.10)에 비하여 유의적으로 높은 결과를 보였다. 이와 같은 연구의 결과는 제주흑우의 동결정액 제조에 있어 ethylene glycol과 항산화제로서 taurine, hypotaurine, trehalose의 조합이 정자를 동결 융해 한 후 운동성, 생존율, 정자막 integrity, 첨체막 integrity 및 정자의 난자 내 침투능력을 개선시킴을 알 수 있으며, 제주흑우 정자의 동결정액 생산에 본 연구의 결과를 활용함으로써 동결 융해 후 정자의 수정능력을 향상시킬 수 있을 것으로 판단된다. 중심어; Ethylene glycol, 항산화제, 동결 정액, 제주흑우