제주대학교 Repository

신서란(P hormium tenax) 추출물과 분획물에 대한 염증 억제 효과

Metadata Downloads
Alternative Title
Anti-inflammatory Activity on Crude Extraction and Solvent fraction of P hormium tenax
Abstract
본 연구에서는 신서란 잎의 추출물과 분획물에 대한 항산화, 염증 및 아토피의
개선소재로써 활용 가능성을 확인코자 연구하였다. 항염증 효능을 확인하기 위하여
RAW 264.7 cell에서 신서란 잎 추출물 및 분획물을 활용하여 실험하였다. 아토피
개선 효능을 확인하기 위하여 hIFN-γ로 자극한 HaCaT 세포에서 신서란 잎 추출
물 및 분획물을 활용하여 실험하였다. 우선 신서란을 70% 에탄올에서 추출물을 제
작하였으며, n-hexane, methylene chloride. ethyl acetate, butanol을 이용하여 분획
물을 제작하였다. 70% 에탄올을 이용한 추출물과 분획물의 항산화 활성, 염증 억
제, 아토피 억제를 확인하였다. 그 결과 항산화 효과는 표준물질과 비교하여 그 효
과가 미미하였다. 염증인자 생성 억제 활성은 LPS 무처리군 (0%), LPS 처리군
(100%)과 각 시료를 처리하여 비교분석 하였다. 특히 분획물 중 methylene chloride
분획물과 ethyl acetate 분획물이 LPS로 자극된 RAW 264.7 cell에서 염증성 매개인
자인 prostaglandin E2 (PGE2) 및 nitric oxide (NO)와 pro-inflammatory cytokines
(interleukin-6 (IL-6), interleukin-β (IL-β), tumour necrosis factor-α (TNF-α))의
생성을 농도 의존적으로 억제하는 것을 확인하였다. 또한 신서란 추출물 및 분획물
에 의한 NO, PGE₂생성 억제 활성이 iNOS와 COX-2의 발현 억제에 의한 것인지
확인하기 위하여 이들 단백질 수준을 Western blot analysis로 확인한 바 LPS 처리
군에서 iNOS와 COX-2가 발현되었으며, methylene chloride. ethyl acetate 분획물
에서 농도 의존적으로 감소함을 알 수 있었다.
아토피 억제효과를 확인하기 위하여 HaCaT 세포에 interferon γ (INF-γ)로 자극
을 주어 유도되는 chemokines (MDC와 TARC)의 활성억제를 조사하였다. 그 결과
MDC, TARC 생성억제에 methylene chloride, ethyl acetate분획물이 농도 의존적으
로 효과가 있었다. 한바 효능이 있음을 알 수 있었다.
위의 결과들을 통해 신서란 추출물과 분획물은 항산화효과는 미미한 것을 알 수
있으며, 항산화효과는 methylene chloride 분획물에서 농도 의존적으로 억제 효과가
있음을 알 수 있었다. 아토피 억제 효과는 분회물에서 효능이 있음을 알 수 있다.
이 조사 결과를 통하여 신서란을 활용한 기능성 향장소재로의 개발을 위한 기초자
료로서 활용할 수 있을 것이라 사료된다.
This study describes a preliminary evaluation of the anti-oxidative,
anti-inflammatory activity, and anti-atopy of P hormium tenax 70%
ethanol extract and solvent fractions. In order to effectively screen for a
natural preservative agent, we first investigated the anti-oxidant
activities such as 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) radical
scavenging capacity, superoxide radical scavenging capacity, xanthine
oxidase inhibitory activity of their. The antioxidant activities showed in
EtOAc and BuOH fraction of P . tenax, compare with ascorbic acid,
butylated hydroxy anisole (BHA), trolox, and allopurinol in these assay
systems. In addition, we examined the inhibitory effect of P . tenax
extract and fractions on pro-inflammatory mediators (Nitric oxide (NO),
inducible nitric oxide synthase (iNOS), prostaglandin E2 (PGE2), COX-2)
and pro-inflammatory cytokines (tumor necrosis factor-α (TNF-α),
interleukin-6 (IL-6), and interleukin-β (IL-β)) in lipopolysaccharide
(LPS)-stimulated RAW 264.7 cells. Finally, we evaluated of their
inhibitory effect on the atopic dermatitis-like inflammatory markers
(macrophage-derived chemkine (MDC), thymus and activation-regulated
chemokine (TARC)) in human keratinocyte HaCaT cells. The CH2Cl2 and
EtOAc fractions of P . tenax inhibited the pro-inflammatory factors and
atopic dermatitis-like inflammatory markers in a dose dependent manner.
These results suggest that P . tenax may have significant effects on
oxidative and inflammatory factors and may be provided as a possible
anti-oxidant and anti-inflammatory therapeutic plant.
Author(s)
양권민
Issued Date
2015
Awarded Date
2016. 2
Type
Dissertation
URI
http://dcoll.jejunu.ac.kr/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000007534
Alternative Author(s)
Yang, Kwon Min
Department
대학원 농화학과
Advisor
김찬식
Table Of Contents
Ⅰ. 서 론 1
Ⅱ. 재 료 및 방 법 6
1. 신서란 잎 시료의 에탄올 추출물 및 분획물 제조 6
2. 항염증 실험 7
2.1. 시약 7
2.2. 세포배양 7
2.3. DPPH radical 소거활성에 의한 항산화활성 측정 7
2.4. Xanthine oxidase 억제 및 Superoxide 소거 활성 8
2.5. 세포 독성(LDH) 측정 8
2.6. Nitric oxide(NO) 생성 억제 활성 측정 8
2.7. Prostaglandin E₂(PGE2) 생성 억제 활성 측정 9
2.8 .Pro-inflammatory cytokines (TNF-α, IL-6, IL-β) 생성 억제 활성 측정 9
2.9. Western blot analysis 10
3. 아토피(Atopy) 유발 인자 억제 활성 실험 10
3.1 세포 배양 및 시약 10
3.2 Chemokines(MDC, TARC) 생성 억제 활성 측정 11
4. 통계처리 11
Ⅲ. 결 과 12
1. 신서란 추출물과 분획물의 항염증 실험 12
1.1 DPPH radical 소거활성에 의한 항산화활성 측정 12
1.2 Xanthine oxidase/Superoxide 억제 활성 13
1.3. 세포 독성(LDH) 및 nitric oxide (NO) 생성 억제 활성 비교 15
1.4. 신서란 추출물과 분획물의 PGE2생성 억제 활성 19
1.5. 신서란 추출물과 분획물의 iNOS, COX-2 발현 억제 활성 23
1.6. 신서란 추출물과 분획물의 cytokines(TNF-α, IL-6, IL-1β) 생성 억제 활성 27
2. 신서란 추출물과 분획물의 아토피 유발 인자 억제 효과 37
2.1 신서란 추출물과 분획물의 Chemokines 생성 변화에 미치는 영향 37
Ⅳ. 고 찰 44
Ⅴ. 참 고 문 헌 46
Ⅵ. 요 약 54
Degree
Master
Publisher
제주대학교 대학원
Citation
양권민. (2015). 신서란(P hormium tenax) 추출물과 분획물에 대한 염증 억제 효과
Appears in Collections:
Graduate School of Industry > Environmental Biotechnology
Authorize & License
  • AuthorizeOpen
Files in This Item:

Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.