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물사과 가지, 풍란 캘러스 추출물의 항산화 및 항염 활성 성분 연구

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Alternative Title
Anti-oxidative and Anti-inflammatory Constituents from Syzygium aqueum Branches and Neofinetia falcata Callus
Abstract
In this study, we investigated identification of anti-oxidative and anti-inflammatory constituents from Syzygium aqueum Burm.f. Alston branches and Neofinetia falcata Thunb. Hu callus. The chemical structures of the isolated compounds were elucidated based on the spectroscopic data including NMR spectra, as well as comparison of the data to the literature values.
Four constituents were isolated from the extract of S. aqueum branches; 3-O-methylellagic acid 3'-O-α-L-rhamnopyranoside (1), 3-O-methylellagic acid 3'-O-α-L-3''-O-acethylrhamnopyranoside (2), pinocembrin (3) and desmethoxymatteucinol (4). As far as we know, compounds 1, 2 and 4 were isolated for the first time from this plant. For the anti-oxidative activities, the EtOAc and n-BuOH layers showed potent DPPH, ABTS^+ radical scavenging activities. Also, among the isolated compounds, compound 1 exhibited stronger ABTS^+ radical scavenging activity than ascorbic acid (positive control). In an anti-oxidative activity assay using HaCaT keratinocyte, the compounds 3 and 4 protected the cell against oxidative stress by H_2O_2. For the anti-inflammation studies using RAW264.7 macrophage, the EtOAc layer reduced expression of iNOS and inhibited the production of NO, PGE_2 and pro-inflammatory cytokines (IL-1β, IL-6). Moreover, compounds 1, 3 and 4 inhibited the production of NO, effectively.
Three phytochemicals were isolated from the extract of N. falcata callus; kaempferol 3-O-robinobioside (5), β-sitosterol (6) and daucosterol (7). As far as we know, all of the compounds were isolated for the first time from this plant callus. The EtOAc layer and compound 5 was examined for their anti-oxidation activities by DPPH and ABTS^+ radical assays. As a result, EtOAc layer and compound 5 showed anti-oxidative activities.
For the anti-inflammation studies, the EtOAc layer inhibited the production of NO, PGE_2 and pro-inflammatory cytokines (TNF-α, IL-1β, IL-6), effectively.
Based on these results, it was suggested that extract and isolated compounds from S. aqueum branches and N. falcata callus could be potentially applicable as anti-oxidative and/or anti-inflammatory ingredients.
Author(s)
염현숙
Issued Date
2018
Awarded Date
2018. 2
Type
Dissertation
URI
http://dcoll.jejunu.ac.kr/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000008471
Alternative Author(s)
Yeom, Hyun Sook
Affiliation
제주대학교 일반대학원
Department
대학원 화학과
Advisor
이남호
Table Of Contents
List of Tables ⅴ
List of Figures ⅶ
List of Abbreviations ⅺ
Abstract xiii
I. 서론 1
II. 재료 및 방법 6
1. 시약 및 기기 6
2. 생리 활성 평가 7
1) 항산화 7
가. 총 폴리페놀 함량 측정 7
나. 총 플라보노이드 함량 측정 8
다. DPPH radical 소거 활성 측정 9
라. ABTS^+ radical 소거 활성 측정 9
마. 세포 보호 효과 10
(1) HaCaT cell 배양 10
(2) 과산화수소(H_2O_2)로 유도된 세포 손상에 대한 세포 보호 효과 10
2) 항염 11
가. RAW264.7 cell 배양 11
나. Nitric oxide (NO) 생성 억제 활성 측정 11
다. PGE_2 및 전염증성 cytokine 생성 억제 활성 측정 12
라. Western blot analysis 13
3) 세포 독성 평가(MTT assay) 14
3. HPLC 함량 분석 15
Ⅲ. 연구 1 : 물사과 가지 추출물의 항산화 및 항염 활성 성분 연구 17
1. 재료 17
2. 물사과 가지의 추출, 분획 및 활성 성분 분리 18
1) 물사과 가지의 추출 및 용매 분획 18
2) Ethyl acetate 분획물의 활성 성분 분리 19
3. 분리된 화합물의 구조 분석 20
1) Compound 1, 2의 구조 동정 20
2) Compound 3, 4의 구조 동정 27
4. 물사과 가지 추출물 및 분획물의 활성 실험 결과 32
1) 항산화 32
가. 총 폴리페놀 함량 측정 32
나. 총 플라보노이드 함량 측정 33
다. DPPH radical 소거 활성 측정 34
라. ABTS^+ radical 소거 활성 측정 35
마. 세포 보호 효과 36
(1) 세포 독성 평가(MTT assay) 36
(2) 과산화수소(H_2O_2)로 유도된 세포 손상에 대한 세포 보호 효과 37
2) 항염 39
가. Nitric oxide (NO) 생성 억제 활성 측정 39
나. PGE_2 생성 억제 활성 측정 42
다. iNOS 및 COX-2 단백질 발현 측정 43
라. 전염증성 cytokine 생성 억제 활성 측정 44
5. 분리된 화합물의 활성 실험 결과 46
1) 항산화 46
가. DPPH radical 소거 활성 측정 46
나. ABTS^+ radical 소거 활성 측정 47
다. 세포 보호 효과 48
(1) 세포 독성 평가(MTT assay) 48
(2) 과산화수소(H_2O_2)로 유도된 세포 손상에 대한 세포 보호 효과 49
2) 항염 51
가. Nitric oxide (NO) 생성 억제 활성 측정 51
6. 요약 및 결론 53
Ⅳ. 연구 2 : 풍란 캘러스 추출물의 항산화 및 항염 활성 성분 연구 55
1. 재료 55
2. 풍란 캘러스의 추출, 분획 및 활성 성분 분리 57
1) 풍란 캘러스의 추출 및 용매 분획 57
2) Ethyl acetate 분획물의 활성 성분 분리 58
3) n-butanol 분획물의 활성 성분 분리 59
3. 분리된 화합물의 구조 분석 60
1) Compound 5의 구조 동정 60
2) Compound 6, 7의 구조 동정 63
4. 풍란 캘러스 추출물 및 분획물의 활성 실험 결과 68
1) 항산화 68
가. 총 폴리페놀 함량 측정 68
나. 총 플라보노이드 함량 측정 69
다. DPPH radical 소거 활성 측정 70
라. ABTS^+ radical 소거 활성 측정 71
2) 항염 72
가. Nitric oxide (NO) 생성 억제 활성 측정 72
나. PGE_2 및 전염증성 cytokine 생성 억제 활성 측정 75
5. 분리된 화합물의 활성 실험 결과 78
1) 항산화 78
가. DPPH radical 소거 활성 측정 78
나. ABTS^+ radical 소거 활성 측정 79
2) 항염 80
가. Nitric oxide (NO) 생성 억제 활성 측정 80
6. 분리된 화합물의 함량 분석 82
1) Compound 5의 함량 분석 82
7. 요약 및 결론 84
Ⅴ. 종합 결론 및 고찰 86
Ⅵ. 참고문헌 89
Degree
Master
Publisher
제주대학교 일반대학원
Citation
염현숙. (2018). 물사과 가지, 풍란 캘러스 추출물의 항산화 및 항염 활성 성분 연구
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General Graduate School > Chemistry
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