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B16F10 cell 에서 백수오 (Cynanchum wilfordii Radix) 추출물 및 단일화합물의 미백 효능평가

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Alternative Title
Inhibitory Effect on Melanogenesis of Extract and Compounds Isolated from Cynanchum wilfordii Radix in B16F10 cells
Abstract
Melanogenesis is a well-known physiological response of human skin that exposure to ultraviolet light, for genetic reasons, or due to other causes. therefore In this study, we assessed the effects of C. wilfordii on melanogenic protein expression of murine B16F10 melanoma cells. We obtained an C. wilfordii extract by treatment with 70% MeOH and then successively partitioned it with n-hexane, CH2Cl2, EtOAc, BuOH and water. Present results indicated that the EtOAc fraction of the C. wilfordii extract was effectively inhibited melanogenesis murine B16F10 melanoma cells. Further Vacuum Liquid chromatography on revers phase silicagel separation of this fraction afforded a p-hydroxyacetophenone and cynandione A. Two compounds effect on melanin formation was assessed. Results indicated that cynandione A was shown to down regulate melanin content in a dose-dependent pattern. To clarify the target of cynandione A action in melanogenesis, we performed Western blotting for tyrosinase, tyrosinase-related protein-1 (TRP-1), TRP-2, and microphthalmia- associated factor (MITF), which are key melanogenic enzymes. Cynandione A inhibited tyrosinase, TRP-1, TRP-2, and MITF expressions in a dose-dependent manner. Therefore, this study suggests that cynandione A is a candidate anti-melanogenic agent, and it might be effective in hyperpigmentation disorders.
Author(s)
김지현
Issued Date
2011
Awarded Date
2012. 2
Type
Dissertation
URI
http://dcoll.jejunu.ac.kr/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000005818
Alternative Author(s)
Kim, Ji hyeon
Affiliation
제주대학교
Department
대학원 식품공학과
Advisor
고영환
Table Of Contents
LIST OF TABLES ⅲ
LIST OF FIGURES ⅳ
ABSTRACT ⅵ
1. 서론 1
2. 재료 및 방법 4
2.1. 시료 4
2.2. 시료의 추출 및 유효성분 분리 4
2.2.1. 백수오의 70% 메탄올 추출 및 용매분획 4
2.2.2. 에틸아세테이트 분획물에서 유효성분 분리과정 4
2.3. HPLC를 이용한 성분분석 7
2.3.1. 분석시료 7
2.3.2. HPLC 분석조건 7
2.4. 미백효과 측정 8
2.4.1. Tyrosinase 효소활성 측정 8
2.4.2. 세포 배양 8
2.4.3. 세포독성 평가 8
2.4.4. 멜라닌 합성 저해율 측정 9
2.4.5. 세포내 tyrosinase 생성 저해율 측정 9
2.4.6. Western blot analysis 9
2.4.7 통계분석 10
3. 결과 및 고찰 11
3.1. HPLC를 이용한 성분함량 분석 11
3.2. Compound 1 및 Compound 2의 분리 및 구조동정 14
3.2.1. compound 1의 분리 및 구조동정 14
3.2.2. compound 2의 분리 및 구조동정 17
3.3. 백수오 추출물의 tyrosinase 저해활성 측정 20
3.3.1. 백수오의 70% 메탄올 추출물과 용매분획물의 tyrosinase 저해 활성 20
3.3.2. Compound 1, 2의 tyrosinase 저해활성 21
3.4. 백수오 추출물이 세포 생존율에 미치는 영향 23
3.4.1. 백수오의 70% 메탄올 추출물과 용매분획물이 세포 생존율에 미치는 영향 23
3.4.2. Compound 1, 2의 세포 생존율에 미치는 영향 23
3.5. 백수오 추출물의 멜라닌 생성 억제효과 26
3.5.1. 백수오의 70% 메탄올 추출물과 용매분획물의 멜라닌 생성 억제효과 26
3.5.2. Compound 1, 2의 멜라닌 생성 억제효과 26
3.6. 백수오 추출물의 세포내 tyrosinase 저해활성 32
3.6.1. 백수오에서 분리된 compound 1, 2의 세포내 저해활성 32
3.7. 멜라닌 합성관련 단백질 발현 억제효과 35
4. 요약 37
5. 참고문헌 38
Degree
Master
Publisher
제주대학교 대학원
Citation
김지현. (2011). B16F10 cell 에서 백수오 (Cynanchum wilfordii Radix) 추출물 및 단일화합물의 미백 효능평가
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General Graduate School > Food science and Engineering
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