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활성 표지 선발법을 이용한 애기장대 저온 저항성 돌연변이체 선발 및 특성 분석

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Abstract
Low temperature is one of the most important environmental stress that lead to the various response of plants such as cold acclimation and vernalization. Also extremely low temperatures(freezing temperatures) limit the geographical distribution of plants and cause severer losses in crop plants. Thus, freezing tolerance in crop plants is an important trait for its commercial value. To find the possible genetic resource, a series of mutants were isolated with enhanced freezing tolerance in the absent of cold acclimation by screening for Arabidopsis activation tagging mutants. Arabidopsis activation tagging mutant showing resistance against freezing was screened from 80,000 T1 activation tagged line. One mutant, freezing-tolerant line 1-Dominant(ftl1-1D), showed dark green, dwarfism and late-flowering. To get inside into molecular function of Freezing-Tolerant Line(FTL1), the FTL1 gene was isolated by using plasmid DNA rescue. The rescued DNA sequence was perfectly matched to AT1G12610(DDF1) of Arabidopsis genomic DNA sequence. Dwarf and Delayed Flowering 1(DDF1), a gene previously reported that FTL1/DDF1 encodes AP2 transcription factor and is involved in the regulation of GA biosynthesis and stress tolerance.
ftl1-1D/ddf1 mutant enhanced not only cold tolerance, but also heat and drought tolerance. However, these phenotype were restored by exogenous gibberellin(GA3). To examine the FTL1/DDF1 gene expression pattern under abiotic stresses, we monitored the time course of the accumulation of FTL1/DDF1 mRNA under abiotic stresses by real-time PCR in wild type. The level of FTL1/DDF1 mRNA in wild type showd that FTL1/DDF1 gene expression is induced by cold, heat, drought and salt stresses. Therefore, FTL1/DDF1 plays a role in regulating responses to several abiotic
Author(s)
정하나
Issued Date
2013
Awarded Date
2013. 2
Type
Dissertation
URI
http://dcoll.jejunu.ac.kr/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000006216
Affiliation
제주대학교 대학원
Department
대학원 생명공학과
Advisor
이효연
Table Of Contents
I. 서론 1
II. 재료 및 방법
1. 식물재료 및 생육조건 4
2. Agrobacterium 형질전환 및 애기장대 형질전환 4
3. 활성 표지 선발법을 통한 저온 저항성 돌연변이체 선발 6
4. 동형접합체 식물의 선발 6
5. 플라스미드 회수 8 6. 스트레스 처리 9
7. 지베렐린(GA3) 처리 10
8. 수분 손실(water loss) 및 전해질 침출(ion leakage) 분석 11
9. RNA 분리 12
10. cDNA 합성 12
11. 야생형 애기장대 스트레스 처리 및 FTL1/DDF1 유전자의 발현분석 12
12. 식물체에서의 스트레스 관련 유전자들의 발현분석 13
III. 결과 및 고찰
1. 저온 처리 시간에 따른 야생형 애기장대의 표현형 15
2. 화분 내 토양 높이에 따른 야생형 애기장대의 표현형 17
3. 활성 표지 선발법을 이용한 저온 저항성 돌연변이체 선발 19
4. 기능 획득 돌연변이 ftl1-1D의 표현형 및 특성 분석 21
5. ftl1-1D/ddf1 돌연변이체의 저온 저항성 표현형 24
6. 저온 처리 시간에 따른 FTL1/DDF1의 발현양상 26
7. 저온 순화 처리에 따른 ftl1-1D/ddf1 돌연변이체의 저온 저항성 표현형 28
8. GA3 처리에 따른 ftl1-1D/ddf1 돌연변이체의 저온 저항성 표현형 30
9. ftl1-1D/ddf1 돌연변이체의 고온 저항성 표형현 32
10. ftl1-1D/ddf1 돌연변이체의 가뭄 저항성 표현형 36
11. 환경스트레스에 따른 야생형 애기장대 내 FTL1/DDF1 유전자의
발현 양상 39
12. ftl1-1D/ddf1 돌연변이체 내 스트레스 관련 유전자들의 발현 양상 42
IV. 종합고찰 44
V. 참고문헌 47
Degree
Master
Publisher
제주대학교
Citation
정하나. (2013). 활성 표지 선발법을 이용한 애기장대 저온 저항성 돌연변이체 선발 및 특성 분석
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